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用ELISA進(jìn)行檢測(cè)的樣本類型包括常見(jiàn)的血液（血清、血漿），組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清以及不常見(jiàn)的皮膚組織、尿液、糞便、肺泡灌洗液、唾液、腦脊液、胸腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等，這些樣本收集的時(shí)間、處理方法和保存都會(huì)影響到ELISA實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。下面就常見(jiàn)ELISA組織樣本處理方法的整理，希望對(duì)您有所幫助。
組織樣本一般是制成組織勻漿，處理方法如下:
1、取適量組織塊，于預(yù)冷PBS（0.02mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿） ；
2、可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入 5-10ml預(yù)冷PBS(組織與 PBS 的質(zhì)量體積比建議為 1:5，即1g 樣本加入 5ml PBS)進(jìn)行充分研磨（有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿），該過(guò)程需在冰上進(jìn)行；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理（超聲破碎過(guò)程中注意冰浴降溫；反復(fù)凍融法可重復(fù) 2 次） 。
3、將制備好的勻漿液于5000×g 離心 5分鐘，留取上清即可檢測(cè)。
4、如果樣本需要長(zhǎng)期保存，請(qǐng)?zhí)砑拥鞍酌敢种苿８鶕?jù)實(shí)驗(yàn)需要，組織勻漿樣本可先定量總蛋白，以便于統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)。某些組織樣本腎臟，腦組織會(huì)有假陽(yáng)性反應(yīng)。處理樣本的過(guò)程就是收集目標(biāo)蛋白的過(guò)程，由于蛋白容易變性，降解，故該過(guò)程應(yīng)盡量溫和。樣本處理之后的儲(chǔ)存也非常重要，尤其注意不要反復(fù)凍融，樣本處理之后可分裝密封保存， 4 度保存應(yīng)小于 1 周，-20 度不應(yīng)超過(guò) 1 個(gè)月，-80度不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月。在標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫，不應(yīng)加熱使之融解。
